El Instituto Traslacional de Singularidad Genómica, invita al Primer Curso de: Actualización en la extracción de ácidos nucleicos, diseño y estandarización de reacciones para qPCR.

Fecha: Del 10 de abril al 22 de mayo del 2023.
Objetivo: Brindar los fundamentos en la extracción de ácidos nucleicos y PCR tiempo real.
Modalidad: Clases teóricas en modalidad virtual asincrónica.
Duración total: 40 horas.
Dirigido a: Profesionales del área biomédica, biológica o médica.
Inscripciones: Es necesario solicitar su inscripciÓn, enviando un correo a contacto@itrasig.org y proporcionando sus datos completos (Nombre completo, último grado de estudios, institución o empresa en la que labora)
Al finalizar el curso y completar las evaluaciones, se expedirá constancia con valor curricular por la Secretaría del Trabajo y previsión social.


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TEMARIO

1. Bases
• Fundamento y parámetros del qPCR.
• Linealidad.
• Eficiencia.
• Especificidad.
• Rango dinámico.
• Químicas de detección.
- Sondas TaqMan
- Molecular beacons.
- Agentes intercalantes.
- Otras..

• Fluoróforos, Quenchers y modificaciones que afectan la hibridación.
• Bases de la fluorescencia en qPCR.
• Detección y calibración óptica.
• Background.
• Efecto de los consumibles en la detección.
• Combinaciones de fluoróforos y quenchers.
• Químicas especiales.
- Inosina
- MGB
- 4Bond
- Propinil
- LNA


2. Diseño de primers y Sondas
• Planteamiento del objetivo del diseño.
• Consideraciones importantes para diseño.
• Software utilizado para el diseño de oligos y sondas.
• Parámetros importantes a considerar para el diseño de oligos y sondas.
• Importancia de la termodinámica de primers en el diseño y la estandarización de los ensayos (Tm, dímeros y estructuras secundarias).
• Consideraciones según el tipo de ensayo a diseñar (SNP’s, punto final, Ensayos Multiplex).
• Control de calidad para la evaluación del diseño.


3. Bioinformática
• Manejo de bases de datos.
• Bases de datos más comunes.
• Metodologías para la concentración y descarga de datos.
• Clusterización.
• Estrategias de alineamiento y búsqueda.
• Algoritmos de alineamiento.
• Degeneraciones.
• Apareamiento de bases.
• Apareamiento W-C.
• Apareamiento No W-C.
• Integración en el diseño.
• Diversidad Teórica – Real.
• Primers virtuales.
• Grupos.


4. Estandarización de ensayos qPCR
• Reconstitución optima de oligos y sondas, y su almacenamiento.
• Soluciones stock.
• Importancia del pH en oligos y sondas.
• Estabilidad de oligos y sondas.
• Análisis de ácidos nucleicos por espectrofotometría.
• Fundamento espectrofotometría.
• Concentración de oligos y sondas y su ajuste (pmol/µl, OD, µg/ml, Molaridad)
• Definición de cantidad y pureza de oligos y sondas de acuerdo al ensayo (escala/rendimiento)
• Controles sintéticos y biológicos.
• Cuantificación de Controles.
• Diluciones seriadas.
• Optimización de termociclado.
• Gradientes de temperatura.
• Sensibilidad (Curvas estándar).
• Fundamentos de sensibilidad.
• Calibradores y estándares.
• Diluciones.
• Consideraciones sobre los equipos de termociclado.
• Pérdida de material por el efecto de los plásticos.


5. Extracción de ácidos nucleicos
• Principio teórico.
• Principales matrices de extracción (suero, sangre, tejidos, otros fluidos)
• Columnas de sílice.
• Perlas magnéticas.
• Plataformas automatizadas.


Este curso fue desarrollado por nuestros equipos de Investigación y Pedagogía, con la finalidad de compartir la información de forma sencilla y práctica. Dicho curso consta de cinco módulos y sus evaluaciones. Para aprobar el curso, es necesario alcanzar un promedio mínimo de 8. Una vez concluido, enviaremos a vuelta de correo su constancia con valor curricular ante la Secretaría del Trabajo y Previsión Social.

Le recordamos que este curso estará disponible del 10 de abril al 22 de mayo del 2023 y que usted podrá cursarlo de acuerdo a sus tiempos y al finalizar cada evaluación le enviaremos un correo con los enlaces correspondientes al siguiente módulo hasta completar el curso, cabe mencionar que usted sólo tendrá una oportunidad para resolver su evaluación.

En caso de presentar alguna situación extraordinaria al momento de realizar su evaluación o si desea una asesoría personalizada, le pedimos que nos lo haga saber al correo contacto@itrasig.org en un horario de 9:00 a 18:00 horas de lunes a viernes.